Kovos su vėžiu forpostas: universalūs tik vėžio žymenys

MINI APŽVALGA

Kovos su vėžiu forpostas: universalūs tik vėžio žymenys

Chengchen Qian1, Xiaolong Zou2, Wei Li1,3, Yinshan Li4, Wenqiang Yu5

1Shanghai Epiprobe Biotechnology Co., Ltd, Šanchajus 200233, Kinija;2 Bendrosios chirurgijos skyrius, pirmoji Harbino medicinos universiteto dukterinė ligoninė, Harbinas 150001, Kinija;3Shandong Epiprobe Medical Laboratory Co., Ltd, Heze 274108, Kinija;4 Ningxia Hui autonominio regiono liaudies ligoninė, Ningxia medicinos universitetas, Yinchuan 750002, Kinija;5 Šanchajaus visuomenės sveikatos klinikinis centras ir bendrosios chirurgijos skyrius, Huašano ligoninė ir vėžio metastazių institutas ir RNR epigenetikos laboratorija, Biomedicinos mokslų institutai, Šanchajaus medicinos koledžas, Fudano universitetas, Šanchajus 200032, Kinija

SANTRAUKA

Vėžys yra pagrindinė mirties priežastis visame pasaulyje.Ankstyvas vėžio nustatymas gali sumažinti mirtingumą nuo visų rūšių vėžio;tačiau veiksmingų ankstyvo aptikimo biomarkerių trūksta daugeliui vėžio rūšių.DNR metilinimas visada buvo pagrindinis susidomėjimo objektas, nes DNR metilinimas paprastai įvyksta prieš kitus aptinkamus genetinius pokyčius.Tiriant bendrąsias vėžio ypatybes naudojant naują vadovo padėties nustatymo sekos nustatymą DNR metilinimui, daugybė universalių vėžio žymenų (UCOM) pasirodė kaip stiprūs kandidatai veiksmingai ir tiksliai ankstyvam vėžio nustatymui.Nors dabartinių vėžio biomarkerių klinikinę vertę mažina mažas jautrumas ir (arba) mažas specifiškumas, unikalios UCOM savybės užtikrina kliniškai reikšmingus rezultatus.Klinikinio UCOM potencialo patvirtinimas sergant plaučių, gimdos kaklelio, endometriumo ir urotelio vėžiu toliau palaiko UCOM taikymą daugeliui vėžio tipų ir įvairių klinikinių scenarijų.Tiesą sakant, šiuo metu UCOM taikymas yra aktyviai tiriamas ir toliau vertinamas ankstyvas vėžio nustatymas, pagalbinė diagnostika, gydymo veiksmingumas ir pasikartojimo stebėjimas.Molekuliniai mechanizmai, kuriais UCOM aptinka vėžį, yra kitos svarbios temos, kurias reikia ištirti.UCOM taikymas realaus pasaulio scenarijuose taip pat reikalauja diegimo ir tobulinimo.

RAKTINIAI ŽODŽIAI

Vėžio nustatymas;vėžio patikra;DNR metilinimas;vėžio epigenetika;vėžio biomarkeriai

Kodėl mums skubiai reikia naujų biomarkeriai?

Po daugiau nei šimtmečio kovos su vėžiu vėžys vis dar yra mirtiniausia biologinė grėsmė žmonijai.Vėžys tebėra pasaulinė sveikatos problema: 2020 m. skaičiuojama 19,3 mln. naujų susirgimų ir beveik 10 mln. mirčių1. 2020 m. Kinijoje buvo diagnozuota 4,6 mln. naujų vėžio atvejų, o tai sudaro 23,7 % naujų vėžio atvejų visame pasaulyje pagal GLOBOCAN1.Be to, 2020 m. Kinijoje nuo vėžio buvo priskirti maždaug 3 milijonai mirčių, o tai sudarė 30 % visų su vėžiu susijusių mirčių pasaulyje1.Ši statistika parodė, kad Kinija užima pirmąją vietą pagal sergamumą vėžiu ir mirtingumą nuo vėžio.Be to, 5 metų vėžio išgyvenamumas yra 40,5%, o tai 1,5 karto mažesnis nei 5 metų išgyvenamumas Jungtinėse Valstijose2,3.Palyginti mažesnis išgyvenamumas ir didesnis mirtingumas Kinijoje nei šalyse, kuriose žmogaus išsivystymo rodikliai aukštesni, rodo, kad skubiai reikia veiksmingos ir ekonomiškos vėžio prevencijos ir stebėjimo sistemos.Ankstyvas vėžio nustatymas yra vienas iš svarbiausių sveikatos priežiūros sistemos elementų.Ankstyvas vėžio nustatymas gali pagerinti beveik visų vėžio tipų prognozę ir išgyvenamumą ankstyvoje stadijoje4.Sėkmingos patikros strategijos lėmė reikšmingą gimdos kaklelio, krūties, storosios žarnos ir prostatos vėžio sergamumo ir mirtingumo nuo jų sumažėjimą.

Tačiau anksti nustatyti vėžį nėra lengva užduotis.Ankstyvojo vėžio biologijos ir prognozės tyrimas, patikimų ankstyvo aptikimo biologinių žymenų nustatymas ir patvirtinimas bei prieinamų ir tikslių ankstyvo aptikimo technologijų kūrimas visada buvo didžiausios kliūtys šiame procese4.Tiksliai nustačius vėžį, galima atskirti gerybinius ir piktybinius pažeidimus, o tai padeda išvengti nereikalingų procedūrų ir palengvina tolesnį ligos valdymą.Dabartinės ankstyvo aptikimo strategijos apima endoskopu pagrįstą biopsiją, medicininį vaizdą, citologiją, imunologinius tyrimus ir biožymenų tyrimus5–7.Kadangi endoskopu pagrįstos biopsijos yra įkyrios ir brangios, jos yra didelė našta, nes tai yra pagrindinė medicininė procedūra, kuri priklauso nuo profesionalaus personalo.Kaip ir citologija, abu atrankos metodai priklauso nuo medicinos specialistų ir yra pagrįsti asmeniniu sprendimu, o rezultatai toli gražu nėra idealūs8.Priešingai, imunologiniai tyrimai yra labai netikslūs, atsižvelgiant į didelį klaidingai teigiamų rezultatų skaičių.Medicininiam vaizdavimui, kaip atrankos taktikai, reikalinga brangi įranga ir specializuoti technikai.Taigi medicininis vaizdas yra labai ribotas dėl mažo prieinamumo.Dėl visų šių priežasčių biomarkeriai yra geresnis pasirinkimas ankstyvam vėžio nustatymui.

Susirašinėjimas: Yinshan Li ir Wenqiang Yu

Email: liyinshan@nxrmyy.com and wenqiangyu@fudan.edu.cn

ORCID ID: https://orcid.org/0009-0005-3340-6802 ir

https://orcid.org/0000-0001-9920-1133

Gauta 2023 08 22;priimtas 2023 m. spalio 12 d.;

paskelbta internete 2023 m. lapkričio 28 d.

Galima rasti adresu www.cancerbiomed.org

©2023 Vėžio biologija ir medicina.Kūribingi panašumai

Priskyrimas – nekomercinė 4.0 tarptautinė licencija

Šiuo metu biomarkeriai skirstomi į baltymus, DNR mutacijų žymenis, epigenetinius žymenis, chromosomų anomalijas, RNR žymenis, gautus tiesiogiai iš navikų, arba naviko fragmentus, netiesiogiai gautus iš kūno skysčių.Baltymų žymenys yra plačiausiai taikomi vėžio atrankos ir diagnostikos biomarkeriai.Baltymų biomarkerius, kaip atrankos biologinius žymenis, riboja polinkis būti paveiktiems gerybinių pakitimų, dėl kurių per daug diagnozuojama ir per daug gydoma, kaip buvo pranešta apie α-fetoproteiną ir prostatos specifinį antigeną (PSA)9,10.RNR žymenys apima genetinės ekspresijos modelius ir kitus nekoduojančius RNR žymenis. Genetinės ekspresijos RNR žymenų derinys gali būti aptiktas naudojant šlapimo mėginius, kurių jautrumas buvo toli gražu nepatenkinamas (60 %) pirminiams navikams, o aptikimas gali būti Įprastoje aplinkoje lengvai skaidosi RNR11.Genetiniai ir epigenetiniai žymenys susiduria su navikų paplitimo ir vėžio tipų apribojimu.

DNR metilinimas buvo stiprus kandidatas kaip ankstyvo aptikimo biomarkeris nuo tada, kai 1983 m. Feinbergas pirmą kartą susiejo su vėžiu12. DNR metilinimo aberacijos stebimos visose vėžio stadijose, net ikivėžinėje stadijoje.Nenormalus DNR hipermetilinimas paprastai vyksta CpG salose genų promotoriuose, siekiant neutralizuoti naviko slopintuvus 13, 14.Tyrimai taip pat parodė, kad nenormalus DNR hipermetilinimas skatina vystymosi reguliatorių reguliavimą15.DNR metilinimo slėnis, kuris dažniausiai yra susijęs su vystymosi reguliatoriais ir hipermetilintais vėžiais, gali pakeisti genų ekspresijos režimą į stabilesnį nuo DNR metilinimo priklausomą režimą ir sumažinti ryšį su metilintu histonu H3K27me3 ir susijusiais polikombiniais baltymais 16, 17.

Tarp daugybės paskelbtų DNR metilinimo žymenų keli sėkmingai debiutavo rinkoje;Tačiau dabartiniai komercializuoti DNR metilinimo žymenys ir diagnostikos skydai dar turi visiškai išnaudoti ankstyvo vėžio nustatymo potencialą dėl daugelio priežasčių18.Nors dažniausiai rodo priimtiną našumą naudojant duomenų bazės informaciją, šie biologiniai žymenys paprastai veikia ne taip idealiai realiame pasaulyje dėl to, kad realaus pasaulio mėginiai dažnai yra sudėtingesni ir ne tokie reprezentatyvūs, kaip atrinkti duomenų bazėse.Įrodyta, kad naujos kartos sekos nustatymu pagrįsta daugelio vėžio metilinimo ankstyva aptikimo I ir II stadijos vėžio jautrumas yra atitinkamai tik 16, 8 % ir 40, 4 %19.Ankstyvo aptikimo testai reikalauja didesnio stabilumo ir tikslesnių biomarkerių.

Universalaus vėžio žymeklio (UCOM) atradimas naudojant vadovo padėties nustatymo seką (GPS)

Nepaisant dešimtmečius trukusių vėžio tyrimų, patenkinama prevencija ir gydymas nebuvo įgyvendinti.Reikia naujų metodų, kad mokslininkai galėtų nuodugniai įvertinti vėžį.Per pastaruosius 23 metus 6 vėžio požymiai, tokie kaip apoptozės išvengimas, audinių invazija ir metastazės ir kt., buvo išplėsti iki 14, įtraukiant tokias funkcijas kaip nemutacinis epigenetinis perprogramavimas ir polimorfiniai mikrobiomai20, 21.Kai atskleidžiama daugiau informacijos apie vėžį, į vėžio tyrimus įtraukiama daugiau perspektyvų.Vėžio tyrimai pamažu atėjo į naują erą dviem kryptimis (bendrumu ir individualumu).Pastaraisiais metais tobulėjant tiksliajai onkologijai, vėžio tyrimų dėmesys nukreiptas į individualizuotą tikslinę terapiją ir vėžio heterogeniškumą22.Taigi, neseniai nustatyti vėžio biomarkeriai daugiausia buvo sutelkti į specifinius vėžio tipus, tokius kaip PAX6 gimdos kaklelio vėžys23 ir BMP3 kolorektaliniam vėžiui24.Šių vėžio tipams būdingų biologinių žymenų veikimas skiriasi, tačiau jautriems asmenims vis tiek neįmanoma vienu metu pasitikrinti dėl visų vėžio formų dėl riboto biologinio mėginio paėmimo ir didelių sąnaudų.Būtų idealu, jei galėtume nustatyti vieną tvirtą biomarkerį, kuris būtų veiksmingas visų tipų vėžiui ankstyvoje stadijoje.

Norint pasiekti tokį idealų tikslą, iš galimų biomarkerio tipų sąrašo turi būti pasirinktas geresnis biomarkerio kandidatas.Yra žinoma, kad DNR metilinimo aberacijos, tarp visų genetinių ir epigenetinių profilių, yra susijusios su vėžiu ir yra vieni iš ankstyviausių, jei ne pirmųjų, su vėžiu susijusių anomalijų, atsirandančių chronologiškai.DNR metilinimo tyrimas pradėtas anksti, tačiau trukdo tyrimo metodų trūkumas.Tarp 28 milijonų galimų metilintų CpG vietų genome turi būti aptiktas ir suderintas su genomu valdomas skaičius, kad būtų galima geriau suprasti navikogenezę.Viso genomo bisulfito sekos nustatymas (WGBS), kuris laikomas auksiniu DNR metilinimo sekos standartu, gali apimti tik 50% Cs vėžio ląstelėse dėl gydymo bisulfitu pobūdžio, kuris pertraukia DNR fragmentus ir sumažina genomo sudėtingumą. Cs transformacija į Ts25.Kiti metodai, tokie kaip 450k lustai, apima tik 1,6% genomo metilinimo.Remiantis 450 000 duomenų, DNR metilinimo aptikimo skydelis turi 35,4 % jautrumą 6 I stadijos vėžio tipams26.Vėžio tipų apribojimai, prastas veikimas ir triukšmas, kurį sukelia aptikimo metodai analizės procese, tapo didžiausiomis kliūtimis visos vėžio aptikimo skydams.

Norėdami geriau ištirti epigenetinius ląstelių modelius navikogenezės ir metastazių metu, sukūrėme unikalų GPS, skirtą viso genomo DNR metilinimo aptikimui, kuris apima iki 96% CpG vietų 0, 4 milijardo skaitymų25.GPS yra dvišalis sekos nustatymo metodas, naudojant nekonvertuojamų metilcitozinų DNR fragmento 3′ galą po apdorojimo bisulfitu, pagal kurį nustatomas 5′ galo DNR metilinimo skaičiavimas per poros galo seką (1 pav.)25.Metil-citozino vadovaujanti grandinė, veikianti kaip šabloninė grandinė, padeda išlyginti aukštą GC regioną ir atkuria labiausiai apleistus sekos duomenis tradicinėje WGBS.Didelė GPS aprėpties funkcija suteikia didžiulį kiekį DNR metilinimo informacijos, kuri leidžia mums ištirti vėžio metilinimo profilius su žymiai didesne skiriamąja geba anksčiau nepakankamai ištirtuose regionuose.

GPS suteikia mums galingą įrankį vėžio homogeniškumui tirti, kuris gali labai supaprastinti vėžio tyrimus ir galbūt rasti universalų navikų atsiradimo ir metastazių paaiškinimą.Analizuojant vėžinių ląstelių linijų GPS duomenis, dažnai buvo susidurta su unikaliu reiškiniu.Buvo keletas regionų, kurie buvo nenormaliai hipermetilinti kelių tipų vėžio mėginiuose.Šis netikėtas atradimas vėliau buvo patvirtintas kaip UCOM.Vėžio genomo atlaso (TCGA) duomenų bazėje buvo išnagrinėta daugiau nei 7000 mėginių iš 17 vėžio tipų, tarp kurių mes nustatėme pirmąjį UCOM, HIST1H4F, su histonu susijusį geną, kuris yra hipermetilintas visų tipų vėžiui27.Tada TCGA duomenų bazėje, Gene Expression Omnibus (GEO) duomenų bazėje ir realaus pasaulio klinikiniuose pavyzdžiuose buvo rasta ir patvirtinta keletas UCOM.Šiuo metu HIST1H4F, PCDHGB7 ir SIX6 buvo rasti ir patvirtinti kaip UCOM.Netikėtas UCOM atradimas yra galingas atsakymas į būtinybę anksti nustatyti vėžį.UCOM yra sprendimas kelių vėžio formų aptikimui vienu žymeniu.

UCOM charakteristikos

Po patvirtinimo buvo įrodyta, kad UCOM pasižymi keturiomis pagrindinėmis savybėmis, leidžiančiomis UCOM pranokti dabartinių biomarkerių veiksmingumą (2 pav.).

Unikali piktybiniams navikams

UCOM yra būdingi tik vėžiniams ar ikivėžiniams pažeidimams ir jiems neturi įtakos įprasti fiziologiniai pokyčiai.Kai kurie dabartiniai su vėžiu susiję žymenys, plačiai taikomi ankstyvam nustatymui ir (arba) atrankai, lėmė per didelę diagnozę.Padidėjęs PSA kiekis, kliniškai akredituotas atrankos įrankis, taip pat nustatomas esant gerybinėms ligoms, tokioms kaip prostatos hiperplazija ir prostatitas10.Dėl per didelės diagnozės ir dėl to per didelio gydymo pablogėja gyvenimo kokybė dėl žarnyno, šlapimo takų ir seksualinių komplikacijų28.Kiti baltymų pagrindu pagaminti ir klinikinėje aplinkoje plačiai naudojami biomarkeriai, tokie kaip CA-125, nedavė reikšmingos naudos, nes buvo per daug diagnozuojamas ir buvo per daug gydomas29.Didelis UCOM specifiškumas piktybiniams navikams leidžia išvengti šių trūkumų.UCOM, PCDHGB7, efektyviai atskiria aukšto laipsnio plokščiuosius intraepitelinius pažeidimus (HSIL) ir gimdos kaklelio vėžį nuo įprastų mėginių ir žemo laipsnio plokščiųjų intraepitelinių pažeidimų (LSIL), o dauguma kitų biologinių žymenų gali atskirti tik gimdos kaklelio vėžį nuo įprastų mėginių30.Nors PCDHGB7 nenustato reikšmingų skirtumų tarp normalaus endometriumo ir endometriumo hiperplazijos, reikšmingi skirtumai nustatomi tarp normalaus endometriumo ir netipinės hiperplazijos, o dar didesni skirtumai nustatomi tarp normalaus endometriumo ir endometriumo vėžio (EB), remiantis PCDHGB731.UCOM yra unikalus piktybiniams pažeidimams duomenų bazėse ir klinikiniuose mėginiuose.Žvelgiant iš paciento perspektyvos, unikalūs UCOM sumažina slenkstį suprasti sudėtingas įvairių prastai veikiančių nestabilių biomarkerių indikacijas ir atitinkamą nerimą vertinimo proceso metu.Gydytojo požiūriu, unikalūs UCOM atskiria piktybinius navikus nuo gerybinių pakitimų, o tai padeda atskirti pacientus ir sumažina nereikalingų medicininių procedūrų ir per didelio gydymo poreikį.Todėl unikalūs UCOM sumažina medicinos sistemos perteklių, sumažina sistemos nerimą ir suteikia daugiau medicininių išteklių tiems, kuriems to reikia.

1 pav. DNR metilinimo aptikimo GPS darbo eigos schema25.Pilka linija: įvesties DNR seka;raudona linija: DNR, apdorota T4 DNR polimeraze, pakeičiant citoziną 5′-metilcitozinu 3′ įvesties gale;mėlynas C su Me: metilintas citozinas;mėlynas C: nemetilintas citozinas;geltonas T: timinas25.

Viskas arba nieko

UCOM yra tik vėžio ląstelėse ir yra stabiliai aptinkamos beveik visose vėžio ląstelėse.Buvo patvirtinta, kad HIST1H4F yra hipermetilintas beveik visų tipų navikuose, bet ne normaliuose mėginiuose27.Panašiai buvo įrodyta, kad PCDHGB7 ir SIX6 yra hipermetilinti visuose naviko mėginiuose, bet ne normaliuose mėginiuose30–32.Ši unikali charakteristika žymiai pagerina UCOM veikimą, atsižvelgiant į aptikimo ir jautrumo ribą.Vos 2 % vėžio ląstelių gali būti diferencijuojamos mėginiuose, todėl UCOM yra daug jautresnis biologinis žymeklis nei dauguma esamų biomarkerių30. KRAS mutacijos, naudojamos kolorektaliniam vėžiui aptikti, egzistuoja tik maždaug 36 % gaubtinės ir tiesiosios žarnos vėžio atvejų. rodo prastą diagnostinį potencialą33.Mažas KRAS mutacijų paplitimas sergant gaubtinės ir tiesiosios žarnos vėžiu riboja KRAS derinį su kitais biomarkeriais.Tiesą sakant, biologinių žymenų derinys iš pradžių gali atrodyti daug žadantis, tačiau ne visada sukuria patenkinamus rezultatus, o aptikimo analizė rodo daug didesnį triukšmą ir paprastai apima sudėtingesnes eksperimentines procedūras.Priešingai, PCDHGB7 ir kiti UCOM egzistuoja visose vėžio formose.UCOMs itin tiksliai aptinka vėžinius komponentus įvairių tipų vėžio mėginiuose, tuo pačiu išnaikindami sudėtingus triukšmą slopinančius analizės procesus.Gausiame mėginyje vėžį aptikti nesunku, tačiau mažame mėginyje aptikti vėžį yra labai sudėtinga.UCOM gali aptikti nedidelį kiekį vėžio.

2 pav. UCOM charakteristikos.

Vėžio nustatymas prieš patologinius pokyčius

UCOM galima aptikti ikivėžinėje stadijoje prieš patologinius pokyčius.Kaip epigenetiniai biomarkeriai, UCOM anomalijos atsiranda ankstesnėje stadijoje nei fenotipiniai anomalijos ir yra aptinkamos auglio atsiradimo, progresavimo ir metastazių metu34, 35.UCOM jautrumas laikui bėgant pagerina UCOM efektyvumą nustatant ankstyvos stadijos vėžį ir ikivėžinius pažeidimus.Ankstyvą vėžio aptikimą remiantis biopsijomis ir citologija gali būti sunku net labiausiai patyrusiems patologams.Viena biopsija, gauta kolposkopijos būdu, buvo teigiama 60,6 % HSIL+ mėginių.Norint padidinti jautrumą, reikalingos papildomos biopsijos, kai yra daug pažeidimų36.Priešingai, UCOM, PCDHGB7, jautrumas HSIL+ mėginiams yra 82%, o tai viršija biopsijų ir daugumos biologinių žymenų jautrumą30.Metilinimo žymeklis FAM19A4 turi 69% jautrumą CIN2+, kuris yra panašus į citologiją, tačiau negali atskirti CIN1 nuo normalių mėginių37.Įrodyta, kad UCOM yra daug jautresnis ankstyvo aptikimo biomarkeris.Palyginti su patirtimi pagrįstais patologais, UCOM pasižymi didesniu ankstyvos stadijos vėžio aptikimo jautrumu, o tai savo ruožtu prisideda prie vėžio prognozės ir išgyvenamumo gerinimo30.Be to, UCOM siūlo aptikimo platformą, kuri yra prieinama toms vietovėms, kuriose trūksta patyrusių patologų, ir labai pagerina aptikimo efektyvumą.Taikant vienodas mėginių ėmimo ir aptikimo procedūras, UCOM aptikimas duoda stabilius ir lengvai interpretuojamus rezultatus, kurie geriau atitinka atrankos protokolą, kuriam reikia mažiau profesionalių darbuotojų ir medicinos išteklių.

Lengva aptikti

Dabartiniai DNR metilinimo aptikimo metodai yra sudėtingi ir reikalauja daug laiko.Daugumai metodų reikalingas bisulfito transformavimas, dėl kurio pablogėja mėginio kokybė ir gali būti gauti nestabilūs ir netikslūs rezultatai.Prastas atkuriamumas, kurį sukelia gydymas bisulfitu, gali sukelti painiavą gydytojams ir pacientams ir dar labiau trukdyti tolesniam stebėjimui ir (arba) gydymo strategijoms.Todėl toliau modifikavome UCOM aptikimo metodą, kad išvengtume probleminio mėginių apdorojimo bisulfitu, atitiktume klinikinio taikymo reikalavimus ir pagerintume prieinamumą.Sukūrėme naują metodą, naudodami metilinimui jautrius restrikcijos fermentus kartu su realaus laiko fluorescencine kiekybine PGR (Me-qPCR), kad kiekybiškai įvertintume UCOM metilinimo būseną per 3 valandas, naudodami paprastas tvarkymo procedūras (3 pav.).Me-qPCR gali pritaikyti kelių tipų mėginius, pvz., klinikinį kūno skysčių rinkimą ir savarankiškai paimtus šlapimo mėginius.Surinktus klinikinius mėginius galima apdoroti, saugoti ir lengvai aptikti naudojant standartizuotą ir automatizuotą DNR ekstrakciją.Tada išskirtą DNR galima tiesiogiai pritaikyti Me-qPCR platformai, kad būtų galima atlikti vieno puodo reakciją ir išvesties kiekybinius rezultatus.Atlikus paprastą rezultatų analizę, naudojant diagnostinius modelius, pritaikytus ir patvirtintus konkretiems vėžio tipams, galutinis UCOM aptikimo rezultatų nustatymas interpretuojamas ir pateikiamas kaip pusiau kiekybinė vertė.Pagal EZ DNA Methylation-Gold rinkinio protokolą Me-qPCR platforma pranoksta tradicinį bisulfito-pirozės nustatymą UCOM aptikimo metu ir sutaupo 3 valandas bisulfito konversijos.Dėl naujoviškos metilinimo aptikimo platformos UCOM aptikimas tampa stabilesnis, tikslesnis ir lengviau pasiekiamas30.

3 pav. UCOM aptikimo procesas.Mėginių tipai apima profesionaliai paimtus BALF mėginius, Pap šepetėlį ir (arba) savarankiškai paimtą šlapimą.DNR ekstrahavimo procesas gali būti pritaikytas automatiniam ekstraktoriui, kurio produktą galima tiesiogiai aptikti naudojant qPCR.

UCOM taikymas

Plaučių vėžys

Plaučių vėžys yra antras dažniausiai diagnozuojamas ir mirtiniausias vėžys visame pasaulyje, sudarantis 11,4 % naujų atvejų ir 18,0 % naujų mirčių1.Iš visų diagnozių 85 % yra nesmulkialąstelinis plaučių vėžys (NSLPV), o 15 % – smulkialąstelinis plaučių vėžys (SCLC), kuris turi didesnį piktybinių navikų lygį38.Mažos dozės kompiuterinė tomografija (LDCT) yra šiuo metu rekomenduojamas plaučių vėžio patikros metodas, kuris pagerina ankstyvą diagnozę ir sumažina mirtingumą6;Tačiau dėl mažo specifiškumo ir prasto prieinamumo LDCT, kaip ir kiti įprasti vėžio žymenys, tokie kaip CEA39, dar turi būti tinkamas atrankos metodas.LDCT atrankos strategijos išlaidos ir galimos praleistos diagnozės bei klaidingos diagnozės trukdo plaučių vėžio patikros skatinimo pažangai40.HIST1H4F, UCOM, turi didžiulį potencialą kaip ankstyvo aptikimo biomarkeris bronchoalveolinio skysčio (BALF) mėginiuose27.HIST1H4F yra hipermetilintas sergant plaučių adenokarcinoma ir plaučių plokščiųjų ląstelių karcinoma, jo aptikimo specifiškumas yra 96, 7%, o jautrumas - 87, 0% (4A pav.), o I stadijos vėžys yra išskirtinis27.HIST1H4F specifiškumas yra 96,5% ir jautrumas 85,4% NSCLC ir atitinkamai 96,5% ir 95,7% SCLC27.Be to, aštuonių kitų vėžio tipų, įskaitant kasos ir storosios žarnos vėžį, mėginiai patvirtino, kad HIST1H4F yra hipermetilintas visuose aštuoniuose vėžio tipuose27.

Gimdos kaklelio vėžys

Gimdos kaklelio vėžys buvo ketvirtas dažniausiai diagnozuojamas vėžys ir ketvirta pagrindinė moterų mirties nuo vėžio priežastis 2020 m., sudariusi 3,1 % naujų atvejų ir 3,4 % su vėžiu susijusių mirčių visame pasaulyje1.Norint iki 2030 m. pašalinti gimdos kaklelio vėžį, kaip siūlo PSO, būtina anksti nustatyti gimdos kaklelio vėžį.Jei nustatoma ankstyvoje stadijoje, sergant invaziniu gimdos kaklelio vėžiu 5 metų išgyvenamumas siekia 92 %41.Amerikos vėžio draugijos (ACS) gairėse siūlomi gimdos kaklelio citologiniai tyrimai, pirminiai ŽPV tyrimai arba atrankos testai42.Gimdos kaklelio citologija yra invazinė ir gali aptikti tik 63,5 % CIN2+ atvejų37.

Priešingai, PCDHGB7 veikė daug geriau naudojant Pap tepinėlius ir makšties išskyras ir gali efektyviai atskirti HSIL nuo LSIL itin ankstyvoje stadijoje.Vien PCDHGB7 jautrumas yra 100,0 %, o specifiškumas – 88,7 % gimdos kaklelio vėžiui (4B pav.), o HSIL+ mėginiams – 82,1 % jautrumas ir 88,7 % specifiškumas30.PCDHGB7 taip pat turi 90,9 % jautrumą ir 90,4 % specifiškumą makšties sekrecijos mėginiuose, skirtuose gimdos kaklelio vėžiui gydyti, kuriuos surinkti daug lengviau30.Kartu su didelės rizikos (hr) ŽPV testu arba Thinprep citologijos testu (TCT), PCDHGB7 jautrumas padidėja 95,7%, o specifiškumas 96,2%, žymiai viršijant hrHPV testą (20,3%), TCT (51,2%). ), ir abu kartu (57,8 %) dėl gimdos kaklelio vėžio30.Taip pat buvo įrodyta, kad PCDHGB7 yra hipermetilintas 17 vėžio tipų iš TCGA duomenų bazės, o tai rodo jo tinkamumą UCOM šeimai30.

4 pav. UCOM buvo patvirtinti keturių tipų vėžiui didelio masto klinikiniuose tyrimuose.A. HIST1H4F, UCOM, veikimas nustatant 508 mėginių plaučių vėžį.B. PCDHGB7, UCOM, efektyvumas nustatant gimdos kaklelio vėžį iš 844 mėginių.C. PCDHGB7, UCOM, efektyvumas nustatant endometriumo vėžį 577 endometriumo Pap ir Tao šepetėlių mėginiuose.D. SIX6, UCOM, efektyvumas nustatant 177 mėginių urotelio vėžį.

EC

EB yra vienas iš labiausiai paplitusių moterų reprodukcinės sistemos vėžio atvejų visame pasaulyje. Apskaičiuota, kad kasmet užregistruojama 4,2 mln. naujų atvejų ir 1 % su vėžiu susijusių mirčių1.Sėkmingai diagnozavus ankstyvoje stadijoje, EB yra išgydoma ir 5 metų I stadijos vėžio išgyvenamumas yra 95%.Pacientai, kuriems būdingi simptomai, pvz., nenormalus kraujavimas iš gimdos, yra periodiškai vertinamos ir atliekamos invazinės bei skausmingos biopsijos procedūros, nepaisant to, kad tik 5–10 % galiausiai išsivysto EC43.Transvaginalinis ultragarsas, kaip įprastas aptikimo metodas, yra labai nepatikimas, nes nesugeba atskirti gerybinių nuo piktybinių endometriumo pokyčių ir didelio klaidingai teigiamų rezultatų44.

Buvo atliktas lygiagretus serumo CA-125, plačiai įdiegto EB biomarkerio, ir PCDHGB7 palyginimas.Serumo CA-125 jautrumas buvo 24,8 %, o tai rodo, kad CA-125 yra netinkamas EB žymuo, nepaisant 92,3 % specifiškumo31.PCDHGB7 aptikimas naudojant Pap šepetėlio mėginius davė 80,65% jautrumą ir 82,81% specifiškumą ECatall stadijose, o Tao šepetėlio jautrumas buvo 61,29% ir specifiškumas 95,31%31.PCDHGB7 diagnostikos modelis, pagrįstas Me-qPCR, davė 98,61% jautrumą, 60,5% specifiškumą ir 85,5% bendrą tikslumą, naudojant Pap ir Tao šepetėlių mėginius (4C pav.)31.

Urotelio vėžys

Urotelio vėžys, susidedantis iš šlapimo pūslės, inkstų dubens ir šlapimtakių vėžio, buvo septintas dažniausiai diagnozuotas vėžys 2020 m. visame pasaulyje, dėl kurio 5,2% naujų atvejų ir 3,9% mirčių1.Urotelio vėžys, iš kurių daugiau nei 50 % yra šlapimo pūslės vėžys, 2022 m. buvo ketvirtas dažniausiai diagnozuotas vėžys Jungtinėse Valstijose ir sudarė 11,6 % naujai diagnozuotų atvejų3.Maždaug 75% šlapimo pūslės vėžio yra klasifikuojami kaip neinvazinis šlapimo pūslės vėžys, apribotas gleivine arba pogleivine45.Cistoskopijos biopsija yra auksinis urotelio vėžio diagnozavimo standartas, atliktas naudojant fluorescencinę in situ hibridizaciją (FISH) ir citologinius tyrimus.FISH ir citologija pasižymi prastais diagnostiniais rezultatais, o cistoskopija yra įkyri, todėl kyla pavojus, kad nebus mikropažeidimų, jie bus neteisingai interpretuojami ir gali sukelti vėžio išplitimą arba atkrytį46.Anksčiau patvirtintas UCOM, PCDHGB7, taip pat buvo hipermetilintas sergant urotelio vėžiu, o plotas po kreive buvo 0, 86, o tai rodo galimą diagnostikos galimybę30.Siekiant dar labiau patvirtinti daugiau UCOM ir geriau pritaikyti daugiau mėginių tipų, buvo ištirtas SIX6, naujas UCOM, ir parodė puikų diagnostinį potencialą anksti nustatyti urotelio vėžį, naudojant šlapimo mėginius Me-qPCR platformoje.SIX6 aptikimas naudojant šlapimo mėginius parodė 86,7 % konkurencinį jautrumą ir 90,8 % specifiškumą (4D pav.), tačiau buvo neinvazinis ir lengvai gaunamas32.Šiuo metu tiriamas SIX6 potencialas stebint metastazes ir vertinant gydymo veiksmingumą.

Ateitis ir iššūkiai

UCOM pasižymi puikiu daugelio vėžio diagnostikos potencialu, tačiau dar liko daug nuveikti.Plėtėme UCOM sąrašą ir aktyviai patvirtinome UCOM sergant daugiau vėžio tipų, įskaitant tuos, kuriuos tradiciškai sunku aptikti.TCGA duomenų bazių patvirtinimo rezultatai dar labiau patvirtino UCOM taikymą gydant daugiau vėžio rūšių ir daugiau situacijų.Preliminariame tyrime buvo įrodyta, kad UCOM turi tvirtą cholangiokarcinomų ir kasos adenokarcinomų diagnostikos potencialą, kurių beveik neįmanoma diagnozuoti ankstyvoje stadijoje naudojant dabartinius atrankos metodus32, 47.Galimybė aptikti retus vėžius naudojant UCOM gali būti panaudota naudojant cirkuliuojančią naviko DNR (ctDNR), naudojant patobulintą skystosios biopsijos platformą48.Tyrimas, kuriame dalyvavo plazmos DNR pagrįsta visos vėžio aptikimo plokštė, parodė 57,9 % jautrumą49.Nepaisant didelio specifiškumo, bendras veikimas rodo, kad dar yra kur tobulėti.

Unikalios UCOM savybės taip pat padėjo ištirti UCOM potencialą vertinant gydymo veiksmingumą ir stebint pasikartojimą.Remiantis atsako vertinimo kriterijais kietuose navikuose (RECIST), medicininis vaizdavimas yra rekomenduojama pasikartojimo stebėjimo ir gydymo veiksmingumo vertinimo metodika, o vertinimui naudojami vien naviko žymenys50.Tačiau iš tikrųjų vaizdo gavimo metodus labai veikia dažnis ir laikas, todėl pacientams kyla didesnė rizika ir didesnės išlaidos51,52.SIX6 buvo patvirtintas kaip krūties vėžio metastazių prognozuotojas32.Skysta biopsija pagrįsta ctDNR stebėjimas leidžia stebėti realiu laiku per minimalius likusius ligos mėnesius prieš radiologinį aptikimą, idealiai atitolinant ir užkertant kelią su atkryčiu susijusiam vėžio progresavimui53.Preliminarūs rezultatai rodo, kad UCOM atspindi vėžio hipermetilinimo lygį realiu laiku iškart po operacijos ir gydymo32.Didelis UCOM jautrumas ir pritaikymas keliems neinvaziniams mėginių tipams leidžia UCOM būti tiksliu pasikartojimo stebėjimo biomarkeriu, išlaikant aukštą paciento atitiktį.

Tuo pačiu metu viešas testo prieinamumas yra dar viena svarbi problema, kuriai reikia papildomų pastangų.Nors UCOM aptikimo bendradarbiavimas buvo priimtas daugiau ligoninių, tikintis, kad bus naudinga daugiau pacientų, Kinijos kaimo vietovėse buvo aktyviai atliekami pro bono aptikimai ir patikrinimai.UCOM reikia geresnio prieinamumo, kad būtų galima laikyti tinkama atrankos priemone, ypač nepakankamai išsivysčiusioms vietovėms.

Nors UCOM programos rezultatai anksti aptikti yra daug žadantys, apie UCOM yra daug nežinomų dalykų.Atliekant aktyvius tyrimus, reikalingi papildomi tyrimai, kodėl UCOM yra visuotinai paplitusios vėžio atveju.Pagrindiniai epigenetinio reguliavimo mechanizmai, kuriais grindžiami UCOM, yra verti tolesnio tyrimo, kuris galėtų pateisinti naują vėžio gydymo kryptį.Grįžtant prie naviko homogeniškumo ir nevienalytiškumo sąveikos, mus domina, kodėl UCOM gali būti daugelio vėžio biomarkerių, glaudžiai susijusių su konkrečiais vėžio tipais, išimtis.UCOM nustatytų DNR metilinimo aberacijų vaidmuo naviko atsiradimui, naviko progresavimui ir metastazėms nebuvo nustatytas prarandant ir atkuriant ląstelių tapatybę, todėl būtina atlikti išsamų patikrinimą.Kitas svarbus interesas yra UCOM homogeniškumo bruožo įtraukimas su unikaliais audinių žymenimis, tikintis, kad bus galima tiksliai aptikti vėžio pėdsakus ir nustatyti naviko audinio kilmę atvirkštiniu būdu.UCOM gali būti ideali priemonė užkirsti kelią vėžiui, aptikti vėžį ir potencialiai apsaugoti bei pašalinti vėžį.

Suteikite paramą

Šį darbą rėmė Kinijos nacionalinė pagrindinių mokslinių tyrimų ir plėtros programa (dotacijos Nr. 2022BEG01003), Kinijos nacionalinis gamtos mokslų fondas (subsidijos Nr. 32270645 ir 32000505), Heilongdziango provincijos sveikatos komisijos dotacija (dotacijos Nr. 2020-111) , ir Heze mokslo ir technologijų instituto dotacija (stipendijos Nr. 2021KJPT07).

Interesų konflikto pareiškimas

Wei Li yra Šanchajaus Epiprobe Biotechnology Co., Ltd. tyrimų ir plėtros direktorius. Wenqiang Yu dirba Epiprobe mokslinėje patariamojoje taryboje.W. Yu ir Epiprobe patvirtino laukiamus patentus, susijusius su šiuo darbu.Visi kiti autoriai nedeklaruoja jokių konkuruojančių interesų.

Autoriaus indėlis

Sugalvojo ir sukūrė projektą: Chengchen Qian ir Wenqiang Yu.

Parašė referatą: Chengchen Qian.

Padarė iliustracijas: Chengchen Qian.

Peržiūrėjo ir redagavo rankraštį: Xiaolong Zou, Wei Li, Yinshan Li ir Wenqiang Yu.

Nuorodos

1. Sung H, Ferlay J, Siegel RL, LaversanneM, Soerjomataram I, Jemal A ir kt.Pasaulinė vėžio statistika 2020 m.: GLOBOCAN įvertinimai

sergamumas ir mirtingumas visame pasaulyje nuo 36 vėžio atvejų 185 šalyse.CA Cancer J Clin.2021 m.;71: 209-49.

2. Xia C, Dong X, Li H, Cao M, Sun D, ​​He S ir kt.Vėžio statistika Kinijoje ir JAV, 2022 m.: profiliai, tendencijos ir veiksniai.Chin MedJ (anglų kalba).2022 m.;135: 584-90.

3. Siegel RL, Miller KD, WagleNS, JemalA.Vėžio statistika, 2023 m. CA Cancer J Clin.2023 m.;73: 17-48.

4. Crosby D, BhatiaS, Brindle KM, Coussens LM, Dive C, Emberton M ir kt.Ankstyvas vėžio nustatymas.Mokslas.2022 m.;375: eaay9040.

5. Ladabaum U, Dominitz JA, KahiC, Schoen RE.Strategijos, skirtos

storosios žarnos vėžio patikra.Gastroenterologija.2020 m.;158: 418-32.

6. Tanoue LT, Tanner NT, Gould MK, Silvestri GA.Plaučių vėžio patikra.Am J Respir Crit Care Med.2015 m.;191: 19-33.

7. Bouvard V, WentzensenN, Mackie A, Berkhof J, BrothertonJ, Giorgi-Rossi P ir kt.IARC perspektyva dėl gimdos kaklelio vėžio patikros.N EnglJ Med.2021 m.;385: 1908-18.

8. Xue P, Ng MTA, QiaoY.Kolposkopijos iššūkiai gimdos kaklelio vėžio patikrai LMIC ir dirbtinio intelekto sprendimai.BMC Med.2020 m.;18: 169.

9. Johnson P, Zhou Q, Dao DY, Lo YMD.Cirkuliuojantys biomarkeriai diagnozuojant ir gydant kepenų ląstelių karcinomą.Nat Rev Gastroenterol Hepatol.2022 m.;19: 670-81.

10. Van PoppelH, Albreht T, Basu P, HogenhoutR, CollenS, Roobol M. Serumo PSA pagrįstas ankstyvas prostatos vėžio nustatymas Europoje ir visame pasaulyje: praeitis, dabartis ir ateitis.Natas kunigas Urolis.2022 m.;19:

562-72.

11. HolyoakeA, O'Sullivan P, Pollock R, Best T, Watanabe J, KajitaY,

ir kt.Daugybinio RNR šlapimo tyrimo, skirto šlapimo pūslės pereinamųjų ląstelių karcinomai nustatyti ir stratifikuoti, sukūrimas.Clin Cancer Res.2008 m.;14: 742-9.

12. Feinberg AP, Vogelstein B. Hipometilacija išskiria kai kurių žmogaus vėžio genus nuo įprastų jų atitikmenų.Gamta.1983 m.;301: 89-92.

13. Ng JM, Yu J. Promoter hypermethylation of tumor supressor gens as potencial biomarker in kolorektalinis vėžys.IntJ Mol Sci.2015 m.;16: 2472-96.

14. Esteller M. Vėžio epigenomika: DNR metilomos ir histonų modifikacijų žemėlapiai.Nat Rev Genet.2007 m.;8: 286-98.

15. Nishiyama A, Nakanishi M. Naršymas vėžio DNR metilinimo kraštovaizdyje.Tendencijos Genet.2021 m.;37: 1012-27.

16. Xie W, Schultz MD, ListerR, Hou Z, Rajagopal N, Ray P ir kt.Žmogaus embrioninių kamieninių ląstelių daugialypės diferenciacijos epigenominė analizė.Ląstelė.2013 m.;153: 1134-48.

17. Li Y, Zheng H, Wang Q, Zhou C, WeiL, Liu X ir kt.Visos genomo analizės atskleidžia Polycomb vaidmenį skatinant DNR metilinimo slėnių hipometilinimą.Genome Biol.2018 m.;19:18.

18. Koch A, JoostenSC, Feng Z, de Ruijter TC, DrahtMX, MelotteV,

ir kt.Vėžio DNR metilinimo analizė: peržiūrėta vieta.Nat Rev Clin Oncol.2018 m.;15: 459-66.

19. KleinEA, Richards D, Cohn A, TummalaM, Lapham R, Cosgrove D ir kt.Tikslinio metilinimu pagrįsto kelių vėžio ankstyvojo nustatymo testo klinikinis patvirtinimas naudojant nepriklausomą patvirtinimo rinkinį.Ann Oncol.2021 m.;32: 1167-77.

20. Hanahan D, Weinberg RA.Vėžio požymiai.Ląstelė.2000;100: 57-70.

21. Hanahan D. Vėžio požymiai: nauji matmenys.Vėžio atradimas.2022 m.;12: 31-46.

22. Schwartzberg L, Kim ES, Liu D, Schrag D. Tikslioji onkologija: kas, kaip, kas, kada ir kada ne?Am Soc Clin Oncol edukacinė knyga.2017: 160-9.

23. Liu H, Meng X, Wang J. Realtime kiekybinis metilinimas

PAX1 geno aptikimas atliekant gimdos kaklelio vėžio patikrą.IntJ ginekolės vėžys.2020 m.;30: 1488-92.

24. Imperiale TF, RansohoffDF, Itzkowitz SH, Levin TR, Lavin P, Lidgard GP ir kt.Daugiafunkcinis DNR tyrimas gaubtinės ir tiesiosios žarnos vėžio atrankai.N EnglJ Med.2014 m.;370: 1287-97.

25. Li J, Li Y, Li W, Luo H, Xi Y, Dong S ir kt.Vadovo padėties nustatymas

sekos nustatymas nustato neįprastus DNR metilinimo modelius, kurie keičia ląstelių tapatybę ir naviko imuninės priežiūros tinklus.Genomas

Res.2019 m.;29: 270-80.

26. Gao Q, LinYP, Li BS, Wang GQ, Dong LQ, Shen BY ir kt.Neįkyrus kelių vėžio aptikimas naudojant cirkuliuojančią DNR metilinimo seką be ląstelių (THUNDER): kūrimas ir nepriklausomi patvirtinimo tyrimai.Ann Oncol.2023 m.;34: 486-95.

27. Dong S, Li W, Wang L, Hu J, Song Y, Zhang B ir kt.Su histonu susiję genai yra hipermetilinti sergant plaučių vėžiu ir hipermetilinti

HIST1H4F galėtų būti visos vėžio biomarkeris.Cancer Res.2019 m.;79: 6101-12.

28. HeijnsdijkEA, Wever EM, AuvinenA, Hugosson J, Ciatto S, Nelen V ir kt.Prostatos specifinio antigeno patikros poveikis gyvenimo kokybei.N EnglJ Med.2012 m.;367: 595-605.

29. LuzakA, Schnell-Inderst P, Bühn S, Mayer-Zitarosa A, Siebert U. Vėžio atrankos biomarkerių testų, siūlomų kaip savarankiškai apmokama sveikatos paslauga, klinikinis efektyvumas: sisteminė apžvalga.Eur J Visuomenės sveikata.2016 m.;26: 498-505.

30. Dong S, Lu Q, Xu P, Chen L, Duan X, Mao Z ir kt.

Hipermetilintas PCDHGB7 kaip universalus tik vėžio žymuo ir jo taikymas atliekant ankstyvą gimdos kaklelio vėžio patikrą.Clin Transl Med.2021 m.;11: e457.

31. Yuan J, Mao Z, Lu Q, Xu P, Wang C, Xu X ir kt.Hipermetilintas PCDHGB7 kaip biomarkeris, skirtas ankstyvam endometriumo vėžio nustatymui endometriumo šepetėlio mėginiuose ir gimdos kaklelio įbrėžimais.Priekyje Mol Biosci.2022 m.;8: 774215.

32. Dong S, Yang Z, Xu P, Zheng W, Zhang B, Fu F ir kt.Abipusiai

išskirtinė epigenetinė SIX6 modifikacija su hipermetilinimu, kad būtų galima atsekti ikivėžinę stadiją ir metastazių atsiradimą.Signal Transduct Target Ther.2022 m.;7: 208.

33. Huang L, Guo Z, Wang F, Fu L. KRAS mutacija: nuo negydomos iki vaistinės sergant vėžiu.Signal Transduct Target Ther.2021 m.;6: 386.

34. Belinsky SA, Nikula KJ, PalmisanoWA, MichelsR, SaccomannoG, GabrielsonE ir kt.Nenormalus p16 (INK4a) metilinimas yra ankstyvas įvykis sergant plaučių vėžiu ir galimas ankstyvos diagnostikos biomarkeris.Proc Natl Acad Sci U SA.1998 m.;95: 11891-6.

35. Robertsonas KD.DNR metilinimas ir žmogaus ligos.Nat Rev Genet.2005 m.;6: 597-610.

36. Wentzensen N, Walker JL, Gold MA, Smith KM, ZunaRE,

Mathewsas C ir kt.Daugybinės biopsijos ir gimdos kaklelio vėžio pirmtakų nustatymas kolposkopijos metu.J Clin Oncol.2015 m.;33: 83-9.

37. De Strooper LM, Meijer CJ, Berkhof J, Hesselink AT, Snijders

PJ, Steenbergen RD ir kt.FAM19A4 metilinimo analizė

Gimdos kaklelio įbrėžimų genas yra labai efektyvus nustatant gimdos kaklelio kaklelį

karcinomos ir pažengę CIN2/3 pažeidimai.Cancer Prev Res (Phila).2014 m.;7: 1251-7.

38. Thai AA, Solomon BJ, Sequist LV, Gainor JF, Heist RS.Plaučių vėžys.Lancetas.2021 m.;398: 535-54.

39. Grunnet M, Sorensen JB.Karcinoembrioninis antigenas (CEA) kaip naviko žymeklis sergant plaučių vėžiu.Plaučių vėžys.2012 m.;76: 138-43.

40. Wood DE, KazerooniEA, Baum SL, EapenGA, EttingerDS, Hou L ir kt.Plaučių vėžio patikra, 3.2018 versija, NCCN Onkologijos klinikinės praktikos gairės.J Natl Compr Canc Netw.2018 m.;16: 412-41.

41. Amerikos vėžio draugija.Vėžio faktai ir skaičiai.Atlanta, GA, JAV: Amerikos vėžio draugija;2023 [atnaujinta 2023 m. kovo 1 d.;cituojamas 2023 m. rugpjūčio 22 d.].

42. FonthamETH, Wolf AMD, Church TR, EtzioniR, Flowers CR,

Herzig A ir kt.Gimdos kaklelio vėžio patikra vidutinės rizikos asmenims: Amerikos vėžio draugijos 2020 m. gairių atnaujinimas.CA Cancer J Clin.2020 m.;70: 321-46.

43. Clarke MA, Long BJ, Del Mar MorilloA, Arbyn M, Bakkum-Gamez JN, Wentzensen N. Endometriumo vėžio rizikos ryšys su moterų kraujavimu po menopauzės: sisteminė apžvalga ir metaanalizė.JAMA intern med.2018 m.;178: 1210-22.

44. Jacobs I, Gentry-MaharajA, Burnell M, ManchandaR, Singh N,

Sharma A ir kt.Transvaginalinio ultragarsinio tyrimo jautrumas

endometriumo vėžiui moterims po menopauzės: atvejo kontrolės tyrimas UKCTOCS grupėje.Lancet Oncol.2011 m.;12: 38-48.

45. BabjukM, Burger M, CompératEM, Gontero P, MostafidAH,

PalouJ ir kt.Europos urologijos asociacijos rekomendacijos dėl neinvazinio šlapimo pūslės vėžio (TaT1 ir karcinomos in situ) –

2019 m. atnaujinimas.Eur Urol.2019 m.;76: 639-57.

46. ​​Aragonas-Chingas JB.Urotelio viršutinių takų ir šlapimo pūslės karcinomų diagnostikos, biologijos ir gydymo iššūkiai ir pažanga.Urol Oncol.2017 m.;35: 462-4.

47. Rizvi S, KhanSA, Hallemeier CL, Kelley RK, Gores GJ.

Cholangiokarcinoma – besivystančios koncepcijos ir gydymo strategijos.Nat Rev Clin Oncol.2018 m.;15: 95-111.

48. Ye Q, Ling S, Zheng S, Xu X. Skysčio biopsija kepenų ląstelėse

karcinoma: cirkuliuojančios naviko ląstelės ir cirkuliuojanti naviko DNR.Mol Vėžys.2019 m.;18: 114.

49. Zhang Y, Yao Y, Xu Y, Li L, Gong Y, Zhang K ir kt.Pan-vėžys

cirkuliuojančio naviko DNR aptikimas daugiau nei 10 000 Kinijos pacientų.Nat Commun.2021 m.;12:11.

50. Eisenhauer EA, Therasse P, BogaertsJ, Schwartz LH, Sargent D, Ford R ir kt.Nauji solidinių navikų atsako vertinimo kriterijai: pataisyta RECIST gairė (1.1 versija).Eur J Vėžys.2009 m.;45: 228-47.

51. LitièreS, Collette S, de Vries EG, Seymour L, BogaertsJ.RECIST – mokymasis iš praeities kuriant ateitį.Nat Rev Clin Oncol.

2017 m.;14: 187-92.

52. Seymour L, BogaertsJ, Perrone A, FordR, Schwartz LH, Mandrekar S ir kt.iRECIST: atsako kriterijų gairės, skirtos naudoti bandymuose

Imunoterapijos testavimas.Lancet Oncol.2017 m.;18: e143-52.

53. PantelK, Alix-Panabières C. Skysčių biopsija ir minimali liekamoji liga – naujausi pažanga ir pasekmės gydymui.Nat Rev Clin Oncol.2019 m.;16: 409-24.

Cituokite šį straipsnį kaip: Qian C, Zou X, Li W, Li Y, Yu W. The forpost against cancer: universal cancer only markers.Cancer Biol Med.2023 m.;20: 806-815.

doi: 10.20892/j.issn.2095-3941.2023.0313